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转基因小鼠模型

转基因技术路线:基因克隆→转基因质粒或同源重组质粒或慢病毒载体设计构建→小鼠受精卵(或ES细胞囊胚腔)显微注射或感染→受精卵(或囊胚)移植→转基因小鼠(或嵌合体小鼠)基因型鉴定(或交配繁育)→育种建系。

转基因导入方式

转基因多拷贝整合:受精卵显微注射

转基因单拷贝整合:受精卵慢病毒感染

转基因定点整合:ES细胞重组

转基因技术类型:常规转基因,多重转基因,BAC转基因、组织细胞或发育时相特异性表达的转基因,Cre-LoxP介导或药物可调的组织细胞或发育时相特异性表达的转基因等。

 

基因剔除小鼠模型

基因剔除技术路线:同源重组质粒设计和构建→小鼠胚胎干细胞(ES细胞)转染→药物抗性克隆筛选→重组ES细胞基因型鉴定→小鼠囊胚腔注射→胚胎移植→嵌合体小鼠交配育种→基因修饰杂合子小鼠繁育鉴定。

基因剔除方式ES细胞同源重组,转座子随机插入

基因剔除类型:常规单基因剔除,Cre-LoxP介导的组织细胞或发育时相特异性基因剔除(条件性基因剔除),药物可调、可逆性基因剔除,突变基因或报告基因“敲入”,大片段基因组缺失突变,染色体工程等。